新型コロナウィルス検出方法である PCR法とは

https://www.niid.go.jp/niid/images/lab-manual/2019-nCoV20200217.pdf
ここに書いてある。

新型コロナウイルス(2019-nCoV)の遺伝子領域2か所(open reading flame 1a (ORF1a) & spike (S))PCRで増幅する。

手順
  1. 痰をPBSで溶かし、20000 x g, 30 minで遠心、上清を得る
  2. QIAamp Viral RNA Mini KitでウィルスからのRNAを抽出
  3. Reverse Transcription
    1. ランダムヘキサマーとoligo dTを使う
  4. 1 st PCR
  5. 2nd PCR (nested PCR)
    1. ここでは1st PCR産物を洗浄せず、1 uL/50 uL加えている
  6. 電気泳動でバンドが確認されれば陽性
結構普通のことをやってるんだな。

アーカイブ

もっと見る