プライマー設計の注意点

プライマー設計の注意点

・通常は20-25 merで設計する

・Tm値が65C以下が望ましい

・3'側の10塩基のGC顔料が高くないように配慮する

・3' 末端はTをやめる。

・ForwardとReverseがアニールしないようにする。とくに3'末端の3塩基が相補的にならないようにする。

・ForwardとReverseのTm値をできるだけ合わせる。